逆转录酶于1970年由Temin和Baltimore独立发现，其主要功能是将RNA转录为cDNA，因而二人于1975年获得诺贝尔生理学或医学奖。逆转录酶具有多个功能域，包括聚合酶域和RNaseH域，其中聚合酶域又细分为“手指”、“手掌”和“拇指”三个亚域，分别负责模板结合、催化反应和功能结构的支持。在分子生物学和分子诊断领域，逆转录酶起着不可或缺的作用。它能够将病毒RNA基因组转化为cDNA，并通过RT-qPCR、RT-LAMP和RNA测序等技术进行检测，这使得对如艾滋病和流感等RNA病毒的准确诊断成为可能。

目前，M-MLV（莫洛尼鼠白血病病毒）逆转录酶是分子诊断试剂中最常用的类型。然而，M-MLV逆转录酶在高温条件下稳定性相对较低，易于失活。这一缺点不仅对其配制的预混液在长期储存中的性能保持提出了挑战，也限制了其在高温逆转录反应中的应用。因此，提升逆转录酶的稳定性成为了重要的研究方向。近日，翌圣团队利用其子公司镁孚泰生物的ZymeEditor™创新酶进化平台，通过一系列实验成功获得了稳定性更高的M-MLV突变体。

在研发过程中，团队采用理性和半理性设计策略，对M-MLV进行了结构-功能的多维度分析。通过序列一致性分析、B因子分析和吉布斯自由能变化分析，确定了结构中的关键氨基酸，并设计了能提升结构稳定性的定点突变。这些努力最终制造出了多个cDNA产量显著提高的突变体，且与对照WT相比，突变体在预混液储存6个月和12个月后的建库产量数据表明其稳定性更优。

基于这些成果，翌圣推出了通过酶定向进化而来的新产品——HifairUCFME® Advanced逆转录酶（货号14614）。这款新型逆转录酶在稳定性和cDNA合成产量方面均实现了显著提升，并且该产品在UCFME®超洁净分子酶生产基地生产，确保了极低的背景菌gDNA残留及核酸酶残留，从而提升了实验结果的准确性和可靠性。

HifairUCFME® Advanced逆转录酶在低浓度模板下，配合快速的逆转录程序（2分钟），也能高效扩增特异性靶标。此外，与同行业竞争产品A相比，HifairUCFME® Advanced逆转录酶在检测Ct值及荧光增幅方面均表现更优，适用于早期筛查和诊断。

在稳定性比较中，当HifairUCFME® Advanced逆转录酶与竞争产品A在相同反应条件下置于37℃五天后，结果显示HifairUCFME®的扩增曲线、荧光值和Ct值均未发生变化，表明其全预混体系的稳定性显著优于竞品。这对于解决全预混体系在长期储存过程中的性能保质问题提供了新思路。

此外，HifairUCFME® Advanced逆转录酶在冻干后的性能测试中也表现良好，冻干后的检测Ct值及荧光增幅均优于竞争对手。这表明即便是在冷冻干燥条件下，HifairUCFME® Advanced逆转录酶依然能保持卓越的性能。

在分子诊断试剂开发过程中，市场上分子酶原料的质量参差不齐，过高的核酸残留会影响扩增产物的准确性和特异性。因此，使用经过严格检测的高质量分子酶原料至关重要。经过实践验证，HifairUCFME® Advanced逆转录酶中的E. coli基因组DNA残留检出结果均低于标准水平，进一步证明了其卓越的品质。

总之，HifairUCFME® Advanced逆转录酶在不同浓度RNA模板下均能够获得优异的文库产量，并且文库大小一致，确保了其在RT-PCR/qPCR及NGS建库应用中的广泛适用性。此款优质酶制品为进一步提升分子诊断的性能提供了保障。

订购信息如下：产品名称：HifairUCFME® Advanced Reverse Transcriptase (200U/μL) 货号: 14614

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